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AGM_de

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1

Tuesday, May 14th 2013, 9:52pm

Mikrovermehrung von Amorphophallus titanum

Vi comunico con gioia, che è riuscito a me per moltiplicare un a. titanum da un segmento di foglia. Egli ha ancora non le radici, ma dopo sei settimane, già sembra molto promettente.

Saluto
Andreas


Shreck

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2

Tuesday, May 14th 2013, 11:42pm

Ciao

Congratulazioni per il successo. Quello che hai fatto non c'è nessun vero Invitrovermehrung ma più o meno una talea di foglia su un terreno fertile. Non sapevo nemmeno che quello è.

Che sembra un buon modo per essere me per talee di foglia.

Vuoi raccontarci il tuo Setup? Può la composizione dell'agar? Inoltre sarebbe interessato nel vostro approccio.


Sono in condizioni di sterilità con autoclave lavorato, o piuttosto preso la tecnologia di casa e poi disinfettati con candeggina e alcool?

Voglio testare a volte cose come quello. Quali ormoni hai usato? BAP e NAA?

Quello che mi chiedo è come si vuole ora mettere il tubero alle radici. Implementare in una terra priva di ormoni?

Sarebbe contento se si partecipa con noi, su questa tecnica:D

MfG
Stephan

AGM_de

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3

Wednesday, May 15th 2013, 10:14am

Na chiaro lasciate che vi partecipano.

L'idea mi è venuta quando ho sentito tentare dal carbone Creek. La relazione può essere trovato in ACTA horticulturae, numero 226 del 1988, se la voglia di leggere qualcuno. A mia conoscenza, questa è stata la prima riproduzione riuscita di a. titanum nel mezzo nutritivo tramite talee di foglia. Ho preso i suoi tentativi ma solo come una guida e scegliere un altro mezzo.

Questo è stato il mio primo tentativo, così fuori non che tutto è andato bene così perfettamente.

Un MS servito come medio medio con 1,0 BAP e agar.

Spiegata tutti provengono dal mio A. seminato in ottobre titanum. 15 Che ho preso dal primo foglio e 7 del secondo foglio. Per questo ho usato i primi due segmenti e utilizzato un segmento della seconda. Le foglie sono state disinfettate in alcol e poi in ipoclorito di sodio. Poi, ho usato solo la nervatura centrale con foglio di circa 1 cm sulle pagine.

La sterilizzazione ha funzionato bene. Di Explanaten 22, poi solo due sono state contaminate. Nel tentativo di Kohlenbach solo ca 50 incontaminato è rimasto di ca 200 Explanaten, quindi sono abbastanza soddisfatto con la mia quota.

Tuttavia, a quanto pare miei occhiali non erano abbastanza, puliti poi ancora spiegata sette sono stati contaminati. Ho il sospetto che fosse perché che ho riempito il mezzo in vasetti puliti ma non sterile e poi sterilizzati da ho riscaldati nel forno a microonde e cuocere per 2 minuti. A quanto pare, spore di muffa sopravvissero sul vetro.

La differenza tra i primi due era che si è verificata la contaminazione al confine tra vetro e mezzo qui e non dal Explanat. La prossima volta sarò sterilizzare così anche i singoli vasetti prima di riempire un mezzo e poi di nuovo insieme con il mezzo.

Il programma di installazione, posso dire che ho un una stanza chiusa hanno lavorato. In primo luogo, io ho spruzzato d'acqua con uno spruzzatore nell'intera stanza da associare tanta polvere. Io ho lavato via il tavolo e tutti gli strumenti con cui ho lavorato, con alcool. Come "scatola pulita" che ho appena preso un IKEA SAMLA scatola che ho messo sulla testa e tagliare un foro di lavorare nella pagina.

Sul tema del radicamento, non sono sicuro ancora. Penso che appena darrüber, se condivido il mio Explanat e metterli sopra le sottoculture e poi questi bewurzele. Mi leggo libri, appena nuovamente attraverso il rilascio di ormoni nei vari Micropropagagation per scoprire quale combinazione di ormone usare assennatamente per la sottocultura. Deve crescere in uno, marca passo due passo a sparare e nella fase tre di scivoloni.

A proposito, sembra che il foglio non può essere troppo vecchio. Spiegata della prima foglia, che aveva circa 5 mesi all'inizio della prova, appassire tutto in uno. Spiegata di giovane foglie sembrano velversprechender.

Sicuramente un argomento interessante. Farò presto tentativi con altri tipi di mio. Quando ho finito, descriverò il programma di installazione ancora più in dettaglio così che gli altri possono farlo.

Shreck

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4

Wednesday, May 15th 2013, 11:21am

La ringrazio molto per la tua spiegazione. Così, come hai descritto, sono andato anche, ma con meno successo.

Vorrei prendere per la radicazione di NAA. La combinazione di BAP & NAA è abbastanza diffusa.

Quanto agar hanno preso dal? Sono sempre stato così stretto che era difficile da ottenere puri pezzi di lamiera:D

E come hanno mescolato il lavaggio? Presumo che hai preso il blu Dan Klorix :) quanto tempo vi ha lasciato gli espianti in esso?

Fintanto che sono stati gli espianti?

AGM_de

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5

Wednesday, May 15th 2013, 11:38am

Che cosa è stato perché il tuo problema che ha portato a meno successo? E dove hai comprato gli ormoni e altro?

Ho preso due misurini di agar, voglio dire l'americano erano "pizzico" per bicchiere. Teoricamente, sono stati riempiti i vasetti di 45 ml. Dato che ho non avuto adatto di misura Coppa ma, abbiamo riempito che tengono più o meno lo stesso dopo occhio. Per alcuni, l'agar-agar è stato anche molto difficile per le foglie. :D Prima di iniziare un nuovo tentativo, I'll acquistare prima un scoop adatto me.

L'ipoclorito di sodio ho un barattolo con un io credo 13% soluzione comprato, che ho poi 1 / 10 usato diluito. Quanto tempo erano lì dentro non posso dire grad, poiché io sono in ufficio, e il mio record sono a casa. Ma penso che era a circa 5 minuti.

Il Explanaten ho scelto ca 2-3 cm di lunghezza, dove non ho usato la punta della lama perché era troppo morbido per l'agar-agar.

Penso che deve avere fatto già 3 - 4 volte il tutto per ottenere un tatto per. Ecco perché mi cercherò volte ora attraverso attraverso la mia collezione. Come nelle ultime settimane, molti sono cacciati, ho abbastanza foglie giovani alla prova. Se il mio titanum unità quindi la terza mano, ho imparato quindi speriamo abbastanza ottenere più di un Explanat successo.



Qualcuno ha qui forse altra esperienze con micropropagazione?


Andreas

Shreck

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6

Wednesday, May 15th 2013, 11:55am

Il mio problema era probabilmente perché che ho cercato un modo per moltiplicare che è quasi non moltiplicare su talee (A.gallaensis). Da allora, gli espianti sono semplicemente trasformati marrone dopo un lungo periodo.
Ho acquistato il mio ormoni da ebay.com. Ci è stato offerto come "acqua solubile NAA" e "acqua solubile IBA". Ho il BAP e sali di Omikron MS.

Il Bernhard sa molto bene che.

7

Sunday, June 23rd 2013, 10:49pm

Ciao Amorphophallusfreunde,
Poiché crescere funghi oltre a piantare e coltivare il micelio su agar-agar, così una sterilizzazione nel forno a microonde non è sufficiente. Le spore di muffa e molte specie di batteri sopravvivono. Deve sterilizzare già mezz'ora o più l'agar agar e la cultura del vetro a 121 ° C. Questo funziona molto bene con una pentola di pressione di vapore. Modo che il vetro non si frantumano, hanno avvolto con carta stagnola. Così, i bicchieri con foglio di alluminio sono chiuso, dove si può avvitare un coperchio dopo la sterilizzazione. In questo modo, ho avuto solo un tasso di contaminazione del 2%, contaminati, ma all'apertura del barattolo durante la vaccinazione. Per evitare questo problema, io uso due bruciatore di Bunsen (cartucce) durante la vaccinazione, così che l'aria calda dal vorticoso polvere e microbi verso l'alto. Così, quasi nulla in vetro vola in esso. Amsonsten è le posate tavola, ecc disinfettati alcol e lavare. Se i vasi si sono raffreddati, quindi passa hanno anelli intorno all'apertura con la vaselina, così nessun acari in vetro fuori e così portano le spore della muffa. Poi ti infili per la vaselina. Gli acari si schiudono anche attraverso crepe sottili, anche se le lenti sono state chiuse con Parafilm.

Perché sono cresciuto finora solo rottami di nave su agar-agar, il malto d'orzo e melassa era beigmischt, non ho esperienza, che cosa voi quali tipi di additivi utilizzati nella moltiplicazione di piante su agar. Dal momento che le piante hanno bisogno di sali minerali, potrei immaginare una soluzione fertilizzante molto debole, perché non si dovrebbero fecondare piantine in genere. Che cosa è esattamente BAP e NAA? Che composizione ha?

AGM_de

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8

Monday, June 24th 2013, 8:46am

Prima di tutto domande, BAP e NAA sono ormoni vegetali o regolatori di crescita. Si può raggiungere attraverso l'aggiunta di uno o più ormoni, che tali callo e radici sono formate dalla Explanat. Ciò che accade dipende da ormoni.

BAP - 6-Benzylaminopurine

NAA - 1-Naphthylessigsäure

Il supporto di MS contenente sali. È una soluzione di fertilizzante. Vedi qui: http://de.wikipedia.org/wiki/Murashige-Skoog-Medium

L'esperienza dimostra che la sterilizzazione a microonde è di solito (non sempre) sufficiente. Vorrei ricordare come Carol Stiff, praticata nella regione americana per coltura tissutale anni per uso domestico, che insegna.

Ho un Explanat ca-tre-mese-vecchio che non mostra finora nessuna traccia di contaminazione. È utile qui sei sicuro che è impostato su medio PPM impedisce la cui contaminazione. Vedi qui http://www.plantcelltechnology.com/about-ppm/

Se volete mettere più vicino per affrontare l'argomento, vi consiglio i seguenti siti:


http://tech.groups.yahoo.com/Group/hometissueculture/
A mia conoscenza, la più grande comunità, che è impegnato nella coltura del tessuto.

http://www.kitchenculturekit.com/index.htm
La pagina di Carol. Qui, è possibile acquistare gli accessori.

http://www.amazon.de/Plants-test-Tubes-I...from+test+Tubes
Il libro delle piante da provette. Una guida completa e introduzione all'argomento.

Saluto
Andreas

9

Wednesday, July 3rd 2013, 11:16pm

Ringrazio per questa risposta. Sapevo che gli ormoni della crescita solo sotto il nome di Naphtylessigsäure, che è incluso anche nella correzione di radice e gli altri ormoni quali auxine e Gibbelerine.
Ora il forno a microonde che ho avuto esperienze molto negative. Che avevo cominciato a volte, per sterilizzare i terreni di coltura. Era salito un estremo spreco di energia, dove i costi di energia elettrica più o meno l'importo e il tasso di contaminazione è stato 90%!
Spesso, schiumarono sopra la cosa e mi sporca a microonde. Poi ho provato con luce a steriliseren, dove il terreno fertile ma distrutto l'ozono e il Kontiminationsrate è stato appena più giù. Avevo provato anche con H2O2 - difficilmente risultati degni di nota ed ha rotto il medium come con ozono. La nave di rottami non poteva crescere è spesso fuori la muffa.

Solo quando ho messo a una pressione di vapore pentola, ho avuto molto buon successo, e fu molto più efficienti rispetto al microonde.
Non uso intenzionalmente anche agenti chimici che mantenere il substrato sterile.

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