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1

Dienstag, 14. Mai 2013, 21:52

Mikrovermehrung von Amorphophallus titanum

Je dois vous informer avec joie, qui a réussi à me pour multiplier une titanum a partir d'un segment de la feuille. Il n'a pas encore de racines, mais après six semaines, il a l'air déjà très prometteur.

Salutation
Andreas


2

Dienstag, 14. Mai 2013, 23:42

Salut

Félicitations pour le succès. Ce que vous faisiez il y est aucune Invitrovermehrung réelle mais plus ou moins un bouturage de feuille sur un terrain fertile. Ne savais même pas que pas

Cela semble un bon moyen pour moi d'être pour les boutures de feuilles.

Pourriez-vous nous dire sur votre installation ? Mai la composition de l'agar ? M'intéresserait également dans votre démarche.


Vous avez dans des conditions stériles avec autoclave a travaillé, ou plutôt pris la technologie de la maison et puis désinfecté à l'eau de Javel et de l'alcool ?

Je ne veux pas tester parfois des trucs comme ça. Quelles hormones avez-vous utilisé ? BAP et NAA ?

Ce que j'ai étonnant, c'est comment vous voulez maintenant mettre le tubercule aux racines. Mettre en œuvre dans un sol sans hormones ?

Serait heureux si vous participez avec nous, sur cette technique:D

MfG
Stephan

3

Mittwoch, 15. Mai 2013, 10:14

Na clair laisser je vous participer.

L'idée m'est venue lorsque j'ai entendu tenter de coal Creek. Le rapport peut être trouvé dans ACTA horticulturae, numéro 226 de 1988, si l'envie de lire quelqu'un. À ma connaissance, c'était la première reproduction réussie d'a. titanum en milieu nutritif par boutures de feuilles. J'ai pris ses tentatives mais seulement comme un guide et que vous choisissez un autre support.

Il s'agissait de ma première tentative, donc pas que tout s'est passé au large et si parfaitement.

Une MS servit de moyen moyen avec 1,0 BAP et agar.

Tous les Explanate viennent de mon A. semés en octobre titanum. 15 Que j'ai pris de la première feuille et 7 de la deuxième feuille. Pour cela, j'ai utilisé les deux premiers segments et utilisé une partie de la seconde. Les feuilles ont été désinfectés à l'alcool, puis dans l'hypochlorite de sodium. Ensuite, j'ai utilisé seulement la nervure moyenne avec environ 1 cm drap sur les pages.

La stérilisation a bien fonctionné. De la Explanaten 22, alors que deux étaient contaminés. Lors de la tentative de Kohlenbach seulement ca 50 non contaminé est resté de ca 200 Explanaten, alors je suis tout à fait satisfait avec mon quota.

Toutefois, apparemment mes lunettes ne étaient pas propres assez, là encore, sept Explanate ont été contaminés. Je soupçonne que c'était parce que j'ai rempli le milieu dans des bocaux propres, mais non stérilisées et puis stérilisé par j'ai il chauffé au micro-ondes et cuire pendant 2 minutes. Apparemment, les spores de moisissure il a survécu sur le verre.

La différence entre les deux premiers, c'était que la contamination à la frontière entre le verre et support a eu lieu ici et non à partir de la Explanat. La prochaine fois je vais stériliser alors même que les pots individuels avant de remplir un support et puis de nouveau avec le milieu.

Le programme d'installation, je peux dire que j'ai un une pièce fermée ont travaillé. Tout d'abord, j'ai pulvérisé l'eau avec un pulvérisateur dans toute la pièce pour lier autant poussière. J'ai lavé la table et tous les instruments avec lesquels j'ai travaillé, avec de l'alcool. Comme « Simply clean », que je viens de prendre un SAMLA IKEA boîte que j'ai mis sur la tête et couper un trou pour travailler dans la page.

Sur le thème de l'enracinement, je ne sais pas encore. Je pense que darrüber juste, si je partage mon Explanat et mettez-les sur les sous-cultures et puis ces bewurzele. Je me lire des livres, juste à travers la question des hormones dans divers Micropropagagation pour savoir quelle combinaison hormone j'utilise judicieusement pour la sous-culture. Vous devez grandir dans un, assurez-vous de deuxième étape étape un shoot et à l'étape trois feuillets.

Par ailleurs, il semble que la feuille ne soient pas trop vieux. Le Explanate de la première feuille, qui avait environ 5 mois au début du procès, se flétrir tous sur un. La Explanate des jeune feuilles ressemblent à velversprechender.

Sans aucun doute un sujet passionnant. Je vais bientôt faire tentatives avec mes autres types. Lorsque j'ai terminé, je vais décrire l'installation encore plus en détail afin que d'autres peuvent le faire.

4

Mittwoch, 15. Mai 2013, 11:21

Je vous remercie beaucoup pour votre explication. Donc, comme vous l'avez décrit, je suis sorti aussi, mais avec moins de succès.

Je ne suis pas à l'enracinement de la NAA. La combinaison de BAP & NAA est assez répandue.

Combien agar ont pris depuis ? J'ai toujours été tellement serré qu'il était difficile d'obtenir des purs morceaux de feuille:D

Et comment vous avez mélangé votre lavage ? Je suppose que vous avez pris le bleu Dan Klorix :) combien de temps avez-vous laisser les explants dedans ?

Aussi longtemps que l'étaient les explants ?

5

Mittwoch, 15. Mai 2013, 11:38

Ce qui a été parce que votre problème qui a conduit à moins de succès ? Et où avez-vous acheté vos hormones et autres ?

J'ai pris deux boules de l'agar, je veux dire l'américain étaient « pincer » par verre. Théoriquement, les pots de 45 ml ont été remplis. Comme je n'avais aucune mesure appropriée coupe mais, j'ai avons rempli qui tiennent à peu près les mêmes après le œil. Pour certains, l'agar était également très difficile pour les feuilles. :D Avant de commencer une nouvelle tentative, je vais acheter tout d'abord une boule adaptée moi.

L'hypochlorite de sodium, j'ai un bidon avec une je crois 13 % solution achetée, dont je puis 1 / 10 utilisé dilué. Combien de temps ils étaient là je ne peux pas dire grad, puisque je suis dans le bureau, et mes disques sont à la maison. Mais je pense que c'est environ 5 minutes.

Dans le Explanaten, j'ai choisi ca 2-3 cm de longueur, où j'ai utilisé n'est plus la pointe de la lame, parce que c'était trop molle pour l'agar.

Je pense que vous avez fait déjà 3 - 4 fois le tout pour obtenir une sensation pour. C'est pourquoi je m'efforcerai de me fois présent dans l'ensemble par le biais de ma collection. Comme ces dernières semaines, beaucoup sont chassés, j'ai assez jeunes feuilles pour tester. Si mon titanum conduit ensuite son troisième main, j'ai appris alors je l'espère assez d'obtenir plus qu'un succès Explanat.



Quelqu'un at-il des expériences éventuellement d'autre ICIS avec la Micropropagation ?


Andreas

6

Mittwoch, 15. Mai 2013, 11:55

Mon problème était probablement parce que j'ai essayé un moyen de multiplier qui n'est presque pas se multiplient sur les boutures (A.gallaensis). Depuis, les explants sont simplement tournés bruns après un long moment.
J'ai acheté mes hormones de ebay.com. Il a été proposé comme "eau soluble NAA" et "eau soluble IBA ». J'ai le BAP et les sels de MS de Omikron.

Le Bernhard sait très bien que.

7

Sonntag, 23. Juni 2013, 22:49

Bonjour Amorphophallusfreunde,
Puisque je fais pousser les champignons en plus de planter et cultiver le mycélium sur l'agar agar, donc une stérilisation au micro-ondes pas suffisamment. Les spores de moisissures et de nombreuses espèces de bactéries survivent. Vous devez stériliser déjà une demi-heure ou plus l'agar agar et la culture du verre à 121 ° C. Cela fonctionne très bien avec une casserole de pression de vapeur. Pour que le verre ne pas éclater, ils enveloppé avec du papier aluminium. Ainsi, les verres avec du papier aluminium sont fermé, où vous pouvez visser un couvercle après stérilisation. De cette façon, j'ai eu seulement un taux de contamination de 2 %, ce qui a contaminé, mais lors de l'ouverture du bocal pendant la vaccination. Pour éviter cela, j'utilise deux bec Bunsen (cartouches) lors de la vaccination, afin que l'air chaud de tourbillon de poussière et microbes vers le haut. Ainsi, presque rien dans le verre vole dedans. Amsonsten est la coutellerie de table, etc. désinfectés alcool et lavage. Si les bocaux sont refroidis, il passe ensuite ils anneaux autour de l'ouverture avec de la Vaseline, donc sans acariens dans le verre dehors et ainsi apportent les spores de moisissure. Puis vous vous en tenez à la Vaseline. Mites éclosent même à travers de fines fissures, même si les lentilles sont clôturés avec Parafilm.

Parce que j'ai grandi seul navire de ferraille sur l'agar agar, le malt d'orge et mélasse était beigmischt, je n'ai aucun expérience, ce qui vous quels types d'additifs utilisés dans la multiplication de plantes sur agar. Puisque les plantes ont besoin de sels minéraux, je ne pouvais imaginer une solution d'engrais très faible, parce que vous ne devriez pas fertiliser semis généralement. Ce qui est exactement le BAP et NAA ? Quelle composition a-t-elle ?

8

Montag, 24. Juni 2013, 08:46

Tout d'abord vos questions, BAP et NAA sont des hormones végétales ou régulateurs de croissance. Vous pouvez atteindre grâce à l'ajout d'une ou plusieurs hormones, que ces cals et les racines sont forment par la Explanat. Ce qui se passe dépend des hormones.

BAP - 6-Benzylaminopurine

NAA - 1-Naphthylessigsäure

Le milieu MS contenant des sels. C'est une solution d'engrais. Voir ici : http://de.wikipedia.org/wiki/Murashige-Skoog-Medium

L'expérience montre que la stérilisation micro-ondes est généralement (pas toujours) suffisante. Je citerai comme Carol Stiff, qui pratiquait dans la région des Amériques pour culture de tissus ans pour usage domestique et il enseigne.

J'ai un Explanat ca-trois mois qui ne montre jusqu'à présent aucune trace de contamination. Il est utile ici bien sûr qui est sur le PPM moyenne dont la contamination empêche. Voir ici http://www.plantcelltechnology.com/about-ppm/

Si vous voulez mettre vous rapproche pour traiter le sujet, je recommande les sites suivants :


http://Tech.groups.yahoo.com/Group/hometissueculture/
À ma connaissance, la plus grande communauté, qui est engagé dans la culture de tissus.

http://www.kitchenculturekit.com/index.htm
La page de Carol. Ici, vous pouvez acheter les accessoires.

http://www.Amazon.de/plants-test-tubes-I...from+test+tubes
Le livre des plantes de tubes à essai. Un guide complet et l'introduction sur le sujet.

Salutation
Andreas

9

Mittwoch, 3. Juli 2013, 23:16

Je vous remercie pour cette réponse. Je savais que les hormones de croissance uniquement sous le nom de Naphtylessigsäure, qui est également inclus dans le correctif de la racine et les autres hormones comme les auxines et Gibbelerine.
Maintenant au micro-ondes j'ai eu de très mauvaises expériences. Que j'avais commencé à l'époque, pour la stérilisation des milieux de culture. C'était un extrême gaspillage d'énergie, où frais d'électricité à peu près le montant a augmenté et le taux de contamination était de 90 % !
Souvent, mousse sur la chose et me micro-ondes sale. Puis j'ai essayé avec UV lumière à steriliseren, où le sol fertile mais détruit la couche d'ozone et le Kontiminationsrate a peine beaucoup vers le bas. J'ai a essayé aussi avec H2O2 - guère réalisations dignes de mention et a brisé les médiums comme avec l'ozone. Le navire de ferraille ne pourrait pas croître est souvent hors du moule.

Seulement quand j'ai mis à une pression de vapeur, la marmite, j'ai eu un très bon succès, et il était beaucoup plus éconergétiques que le micro-ondes.
Je n'utilise intentionnellement aussi aucuns produits chimiques qui empêchent le substrat stérile.

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