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1

Dienstag, 14. Mai 2013, 21:52

Mikrovermehrung von Amorphophallus titanum

Debo informarle con alegría, que tuvo éxito para multiplicar un a. titanum de un segmento de la hoja. Tiene raíces todavía no, pero después de seis semanas, ya parece bastante prometedor.

Saludo
Andreas


2

Dienstag, 14. Mai 2013, 23:42

Hola

Felicitaciones por el éxito. Lo que has hecho allí es no Invitrovermehrung real pero más o menos un esquejes de hoja en un caldo de cultivo. Ni siquiera sabía que eso es

Parece una buena forma de ser yo para esquejes de hoja.

¿Nos dicen acerca de la configuración? ¿Puede la composición del agar? También estaría interesado en su enfoque.


¿Tiene condiciones estériles con autoclave trabajado, o más bien toma la tecnología de la casa y luego desinfectados con cloro y alcohol?

¿quiero probar a veces cosas como eso. ¿Cuáles hormonas se ha utilizado? ¿BAP y NAA?

Lo que me pregunto es cómo desea poner ahora el tubérculo a las raíces. ¿Implementar en un suelo libre de hormonas?

Le espera si usted participa con nosotros, en esta técnica:D

MfG
Stephan

3

Mittwoch, 15. Mai 2013, 10:14

Na clara dejó que lo que se refiere.

La idea vino a mí cuando me enteré que trate de carbón Creek. El informe puede encontrarse en ACTA horticulturae, número 226 de 1988, si los quieren leer a alguien. Que yo sepa, esta fue la primera reproducción exitosa de a. titanum en medio nutritivo mediante esquejes de hoja. Tomé sus intentos, pero sólo como una guía y elegir otro medio.

Este fue mi primer intento, tan apagado no que todo salió tan bien perfectamente.

Un MS sirve como medio medio con 1,0 BAP y agar.

Explanate todos vienen desde mi A. siembra en octubre titanum. 15 Que he tomado de la primera hoja y 7 de la segunda hoja. Para eso usé los dos primeros segmentos y utiliza un segmento de la segunda. Las hojas fueron desinfectadas en alcohol y luego en hipoclorito de sodio. Entonces, he usado sólo la costilla media con hoja de aproximadamente 1 cm en las páginas.

La esterilización ha funcionado bien. De la Explanaten 22, entonces sólo dos fueron contaminados. En el intento de Kohlenbach sólo ca 50 incontaminada permanecía de ca 200 Explanaten, así que estoy bastante satisfecho con mi cuota.

Sin embargo, al parecer mis gafas no eran suficientemente, limpias entonces nuevo Explanate siete fueron contaminados. Sospecho que fue debido a que he llenado el medio en frascos limpios pero y luego esterilizado por he calentado en el microondas y cocina durante 2 minutos. Al parecer, las esporas de moho sobrevivieron él sobre el vidrio.

La diferencia entre los dos primeros era que la contaminación en la frontera entre el vidrio y medio ocurrió aquí y no de la Explanat. La próxima vez voy esterilizar hasta incluso los recipientes individuales antes de llenar un medio y luego otra vez junto con el medio.

La configuración, puedo decir que un han trabajado una habitación cerrada. En primer lugar, he rociado de agua con un rociador en toda la habitación para enlazar tanto polvo. He lavada de la mesa y todos los instrumentos con los que he trabajado con alcohol. Como "caja limpia" que sólo he tomado un IKEA SAMLA caja puse en la cabeza y hacer un agujero para trabajar en la página.

Sobre el tema de enraizamiento, no estoy seguro todavía. Creo que sólo darrüber, si comparto mi Explanat y ponerlos en los subcultivos y, a continuación, estas bewurzele. Me leí libros, sólo otra vez mediante la emisión de hormonas en varios Micropropagagation para averiguar qué combinación de hormona utilizo sensiblemente por la subcultura. Debe crecer en el paso, paso dos hacer una sesión y en el paso tres a resbalones.

Por cierto, parece que la hoja no puede ser demasiado vieja. El Explanate de la primera hoja, que era cerca de 5 meses de edad al inicio del ensayo, se marchita todo en uno. Explanate de aspecto más joven de la hoja como velversprechender.

Sin duda un tema apasionante. Voy a hacer pronto intentos con mis otros tipos. Cuando he terminado, voy a describir la configuración otra vez más detalle para que otros puedan hacerlo.

4

Mittwoch, 15. Mai 2013, 11:21

Muchas gracias por tu explicación. Por lo tanto, como se lo describe, salí también, pero con menos éxito.

¿aprovecho para el enraizamiento de NAA. La combinación de BAP y NAA es bastante generalizada.

¿Cuánto agar ha tomado desde? Siempre he sido tan estrecha, que era difícil conseguir piezas puros de hoja:D

¿Y cómo se han mezclado el lavado? Supongo que te has tomado el azul Dan Klorix :) ¿cuánto tiempo dejas a los explantes en él?

¿Mientras fueron los explantes?

5

Mittwoch, 15. Mai 2013, 11:38

¿Lo que fue porque su problema que llevó a menos exitosa? Y ¿donde has comprado tus hormonas y otros?

He tomado dos cucharadas del agar, osea el americano fueron "pellizcar" por vaso. Teóricamente, se llenaron los frascos de 45 ml. Tuve ninguna medición conveniente Copa pero, hemos llenado que tienen aproximadamente la misma después de ojo. Para algunos, el agar también fue muy difícil para las hojas. :D Antes de empezar un nuevo intento, voy a comprar primero una bola conveniente me.

Creen que el hipoclorito de sodio, tengo un bote con un 13% solución comprado, que yo entonces 1 / 10 utilizado diluido. ¿Cuánto tiempo estaban ahí no puedo decir grad, puesto que estoy en la oficina, y mis expedientes están en el país. Pero creo que era de unos 5 minutos.

En el Explanaten yo escogí ca 2-3 cm de longitud, donde ya no he usado la punta de la cuchilla ya que era demasiado blando para el agar.

Creo que debió hacer ya 3 - 4 veces el todo para tener una idea para. Por esta razón me trataré de tiempos de ahora a través de a través de mi colección. Al igual que en las últimas semanas, muchos se expulsan, tengo suficientes hojas jóvenes para probar. Si mi titanum entonces conduce su tercera mano, aprendí entonces esperemos que lo suficiente conseguir más que un éxito Explanat.



¿Alguien aquí posiblemente más experiencias con micropropagación?


Andreas

6

Mittwoch, 15. Mai 2013, 11:55

Mi problema era probablemente debido a que yo he probado una manera multiplicar que casi no es multiplicar en cortes (A.gallaensis). Desde entonces, los explantes son simplemente se convirtió marrón después de mucho tiempo.
He comprado mis hormonas de ebay.com. Allí fue ofrecido como "agua soluble NAA" y "agua soluble IBA". Yo tengo el BAP y las sales MS de Omikron.

El Bernhard sabe muy bien que.

7

Sonntag, 23. Juni 2013, 22:49

Hola Amorphophallusfreunde,
Ya que crecen setas además de plantar y cultivar el micelio sobre agar-agar, así una esterilización en microondas no es suficiente. Las esporas de moho y muchas especies de bacterias sobreviven. Deben esterilizar ya media hora o más, el agar agar y la cultura de vidrio a 121 ° C. Esto funciona muy bien con una olla de presión de vapor. Para que no romper el cristal, lo envolvió con papel de aluminio. Así, los vidrios con papel de aluminio se cerró, donde puede atornillar una tapa después de la esterilización. De esta manera, tenía sólo una tasa de contaminación de 2%, lo cual contamina sino en la apertura de la jarra durante la vacunación. Para evitar esto, puedo usar dos mechero de Bunsen (cartuchos) durante la vacunación, para que el aire caliente de remolinos de polvo y microbios hacia arriba. Por lo tanto, casi nada en la Copa vuela hacia él. Amsonsten es los cubiertos de mesa, etc. desinfectados con alcohol y lave. Si se enfrían los frascos, luego pasa que anillos alrededor de la abertura con vaselina, así no los ácaros en el cristal hacia fuera y así traen las esporas de moho. Luego se meten a la vaselina. Los ácaros de la portilla incluso a través de grietas finas, incluso si las lentes se han cerrado con Parafilm.

Porque yo he crecido hasta ahora única nave de chatarra en agar-agar, la malta de cebada y melaza era beigmischt, no tengo ninguna experiencia, lo que usted qué tipo de aditivos utilizados en la multiplicación de plantas en el agar. Puesto que las plantas necesitan sales minerales, imaginaba una solución de fertilizante muy débil, porque no debe fertilizar plantas generalmente. ¿Qué es BAP y NAA? ¿Qué composición tiene?

8

Montag, 24. Juni 2013, 08:46

Primeramente sus preguntas, BAP y NAA son fitohormonas o los reguladores de crecimiento. Se puede llegar mediante la adición de una o más hormonas, que tal callo y raíces se forman por la Explanat. Lo que sucede depende de las hormonas.

BAP - 6-bencilaminopurina

NAA - 1-Naphthylessigsäure

El medio MS que contiene sales. Es una solución de fertilizante. Ver aquí: http://de.wikipedia.org/wiki/Murashige-Skoog-Medium

La experiencia demuestra que la esterilización de microondas es generalmente (no siempre) suficiente. Quisiera mencionar como Carol Stiff, que practicaba en la región de América para el cultivo de tejidos de años para uso doméstico y enseña.

Tengo un Explanat de la ca de tres meses que muestra hasta ahora no hay rastros de contaminación. Es útil aquí seguro que se establece en el medio PPM impide que la contaminación. Ver aquí http://www.plantcelltechnology.com/about-ppm/

Si quieres ponerte más cerca para enfrentar el tema, te recomiendo los siguientes sitios:


http://Tech.groups.Yahoo.com/Group/hometissueculture/
Que yo sepa la comunidad más grande, que se dedica a la cultura del tejido.

http://www.kitchenculturekit.com/index.htm
La página de Carol. Aquí, usted puede comprar los accesorios.

http://www.Amazon.de/plants-test-tubes-I...from+test+tubes
El libro de las plantas de tubos de ensayo. Una guía completa y la introducción al tema.

Saludo
Andreas

9

Mittwoch, 3. Juli 2013, 23:16

Gracias por esta respuesta. Yo sabía que las hormonas de crecimiento solamente bajo el nombre Naphtylessigsäure, que está incluido también en la solución de raíz y las otras hormonas como auxinas y Gibbelerine.
Ahora el microondas he tenido muy malas experiencias. Que había comenzado a veces, para esterilizar medios de cultivo. Fue disparado de una extrema pérdida de energía, donde los costes de electricidad bastante tanto en la cantidad y la tasa de contaminación era 90%!
A menudo, espuma sobre la cosa y me microondas sucio. Entonces probé con luz a steriliseren, donde la tierra fértil pero destruye el ozono y el Kontiminationsrate fue apenas mucho por UV. Yo había intentado también con H2O2 - apenas logros destacables y rompió los medios como con ozono. La nave de desecho no podría crecer está a menudo fuera del molde.

Sólo cuando me pongo a una presión de vapor olla, tenía muy buen éxito, y fue mucho más eficientes que el microondas.
Intencionalmente no usar a también agentes químicos que mantienen el sustrato estéril.

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